原生質(zhì)體培養(yǎng)

原生質(zhì)體培養(yǎng)（4學(xué)時(shí)）
教學(xué)目的與要求：
深入了解植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能與細(xì)胞全能性表達(dá)的關(guān)系，掌握原生質(zhì)體的分離以及培養(yǎng)過(guò)
程中滲透壓和激素的調(diào)控原理與技術(shù)。
第一節(jié)、原生質(zhì)體研究概況
一、原生質(zhì)體的概念
? 原生質(zhì)體(protoplast)：指除去細(xì)胞壁的細(xì)胞或是說(shuō)一個(gè)被質(zhì)膜所包圍的裸露細(xì)胞。
? 亞原生質(zhì)體(subprotoplast)：在原生質(zhì)體分離過(guò)程中，有時(shí)會(huì)引起細(xì)胞內(nèi)含物的斷裂而形
成一些較小的原生質(zhì)體就叫做亞原生質(zhì)體。它可以具有細(xì)胞核或沒(méi)有細(xì)胞核。
? 核質(zhì)體(nuclearplast)：由原生質(zhì)膜和薄層細(xì)胞質(zhì)包圍細(xì)胞核形成的小原生質(zhì)體。也稱(chēng)為
微小原生質(zhì)體(miniprotoplast)。
? 胞質(zhì)體（cytoplast）：不含細(xì)胞核而僅含有部分細(xì)胞質(zhì)的原生質(zhì)體。
二、原生質(zhì)體研究進(jìn)展
植物原生質(zhì)體培養(yǎng)研究中幾個(gè)值得提出重要成就：
? 1880年，Hanstein首次起用原生質(zhì)體(protoplast)一詞。
? 1960年，Cocking首次應(yīng)用酶法制備番茄根原生質(zhì)體獲得成功。
? 1971年，Takebe et al.首次得到煙草葉肉原生質(zhì)體培養(yǎng)的再生植株。
? 1985年，F(xiàn)ujimura et al.第一例禾谷類(lèi)作物－水稻原生質(zhì)體培養(yǎng)再生植株。
? 1986年，Spangenberg et al.單個(gè)原生質(zhì)體培養(yǎng)再生植株在甘藍(lán)型油菜上獲得成功。
據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前已有49個(gè)科，146個(gè)屬的320多種植物經(jīng)原生質(zhì)體培養(yǎng)得到了再生植株
（1993）。其趨勢(shì)仍以農(nóng)作物和經(jīng)濟(jì)作物為主，但從一年生向多年生、草本向木本、高等植
物向低等植物擴(kuò)展。
三、原生質(zhì)體研究的意義
第二節(jié)、原生質(zhì)體的制備
1、用于分離原生質(zhì)體的材料準(zhǔn)備
? 無(wú)菌試管苗葉片
? 上胚軸和子葉
? 培養(yǎng)細(xì)胞