作為一種精確控制和操控微尺度流體的技術(shù),微流控(microfluidics)以在微納米尺度空間中對流體進(jìn)行操控為主要特征,具有將生物、化學(xué)等實驗室的基本功能諸如樣品制備、反應(yīng)、分離和檢測等縮微到一個幾平方厘米芯片上的能力,其基本特征和最大優(yōu)勢在于多種單元技術(shù)在整體可控的微小平臺上靈活組合、規(guī)模集成,涉及工程學(xué)、物理學(xué)、化學(xué)、微加工和生物工程等多個領(lǐng)域的學(xué)科交叉。
微流控檢測芯片一般具有樣品消耗少、檢測速度快、操作簡便、多功能集成、體小和便于攜帶等優(yōu)點。到目前為止,制作微流控芯片的材料主要有:硅、玻璃、石英、高聚物、陶瓷、紙等。選擇合適的材料對于制作工藝選擇和微流控芯片的成功應(yīng)用非常重要。其中,微流控紙芯片(lab-on-paper,紙上微型實驗室)是近幾年發(fā)展的一種新型微流控芯片。具有成本更低、分析系統(tǒng)更易微型化、便攜化、生物相容性好、檢測背景低、 后處理簡單,無污染等優(yōu)勢。近年來,微流控芯片技術(shù)的發(fā)展為癌細(xì)胞檢測的研究提供了很多新的思路, 作為一個新型的無創(chuàng)檢測平臺,具有高度的可行性和可重復(fù)性。
微流控在單細(xì)胞水平上的研究進(jìn)展迅速。在生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)以及生物學(xué)等諸多領(lǐng)域,經(jīng)常需要從較為復(fù)雜的樣品中分選出所需要的單個細(xì)胞,以進(jìn)行后續(xù)的科學(xué)研究,如癌癥研究中分選獲得單個癌細(xì)胞是后續(xù)進(jìn)行單細(xì)胞測序的關(guān)鍵前提。今年,大連海事大學(xué)開發(fā)了一種在單細(xì)胞水平上全自動操控細(xì)胞的微流控芯片裝置,裝置主要由微流控芯片、差分放大器、繼電器、數(shù)據(jù)采集卡以及計算機(jī)等組成。整個分選過程由細(xì)胞經(jīng)過檢測區(qū)域產(chǎn)生的電壓脈沖信號幅值來控制。采用電滲流可以有效地操控單個細(xì)胞,當(dāng)樣品中細(xì)胞濃度足夠低時,可以實現(xiàn)100%的有效分選。完成一次分選大約需要3s,系統(tǒng)單個檢測區(qū)的最大分選通量約為20個每分鐘,后續(xù)可以通過設(shè)置多個檢測區(qū)來提高分選通量。有效克服了現(xiàn)有單細(xì)胞操控技術(shù)存在的各種不足之處。
表面增強(qiáng)拉曼光譜( surface enhanced Raman spectroscopy ,SERS) 與微流控芯片相結(jié)合用于光流體檢測可以實現(xiàn)快速、無損傷檢測分析。表面增強(qiáng)拉曼光譜是一種新興的、具有超 高靈敏度無標(biāo)記指紋的高級痕量分析技術(shù),穩(wěn)定、重現(xiàn)、高強(qiáng)度、高靈敏度的 SERS 信號是獲取有效生物傳感信息的首要條件。大量研究表明,可控性金屬納米粒子聚集體或納米顆粒陣列對產(chǎn)生上述SERS信號至關(guān)重要。在臨床免疫檢測過程中,SERS 生物傳感器不僅能快速檢測單一生物蛋白標(biāo)志物,而且基于固態(tài) SERS 活性基底的生物傳感器可以實現(xiàn)敏感性、特異性生物標(biāo)記物的同時檢測。便攜式智能化的微流體 SERS 生物傳感器檢測設(shè)備將在醫(yī)療保健、環(huán)境監(jiān)測以及食品安全等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
另外,微流控芯片還可用于構(gòu)建腫瘤微環(huán)境。該芯片具有3層復(fù)合式結(jié)構(gòu): 底層為微通道貫穿的細(xì)胞培養(yǎng)池陣列,頂層是開放式培養(yǎng)池,二者之間為一層納米孔薄膜。納米孔薄膜具有“透氣阻水”的特性,既起到止流閥作用實現(xiàn)液體自動分配,又允許跨膜擴(kuò)散,模擬血管內(nèi)皮層擴(kuò)散屏障結(jié)構(gòu)。結(jié)合移液工作站,開放式微流控芯片可以完成細(xì)胞換液、藥物處理和細(xì)胞活力測試等一系列分析步驟。
隨著微流控技術(shù)和光學(xué)傳感技術(shù)的發(fā)展,一系列被用于細(xì)胞遷移和外泌體檢測的微流控芯片也相繼被開發(fā),局域表面等離子體共振傳感技術(shù)由于其無需標(biāo)記、可便攜等優(yōu)點在生物傳感檢測領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。
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