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基于高能量密度聲鑷的細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù),用于提升細(xì)胞和基因療法的療效和安全性

微流控 ? 來(lái)源:微流控 ? 2024-04-29 11:13 ? 次閱讀

癌癥嚴(yán)重危害人們的生命健康,嵌合抗原受體T細(xì)胞(CAR-T)免疫療法是最具前景的腫瘤療法之一,被譽(yù)為“癌癥治療的第四次革命”。細(xì)胞轉(zhuǎn)染是CAR-T細(xì)胞治療的關(guān)鍵技術(shù),通過(guò)基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)染患者的T細(xì)胞,表達(dá)嵌合抗原受體,使得患者的T細(xì)胞被“重編碼”后,能夠特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞,從而進(jìn)行選擇性殺傷。因此,細(xì)胞轉(zhuǎn)染直接影響了CAR-T的療效和安全性。

近日,中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院孟龍研究員等與美國(guó)杜克大學(xué)Tony Jun Huang教授合作,在Science子刊Science Advances上發(fā)表了題為“Acoustothermal transfection for cell therapy”的研究成果,并登上了該期雜志的封面。該研究創(chuàng)新地提出了利用高能量密度聲鑷誘發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生可控的微米量級(jí)形變,提高細(xì)胞膜通透性,實(shí)現(xiàn)了對(duì)原代免疫細(xì)胞、干細(xì)胞的高效、高通量轉(zhuǎn)染,為細(xì)胞免疫治療、基因治療提供了革新手段。

聲鑷技術(shù)是利用梯度聲場(chǎng)產(chǎn)生的力學(xué)效應(yīng)對(duì)聲場(chǎng)中的顆粒進(jìn)行捕獲、移動(dòng)、搬運(yùn)等操作的一種技術(shù)。該研究通過(guò)聲場(chǎng)的調(diào)制,提高了聲場(chǎng)的能量密度,產(chǎn)生了納牛量級(jí)的超聲輻射力,在聲鑷操控細(xì)胞空間運(yùn)動(dòng)的基礎(chǔ)上,實(shí)現(xiàn)了誘發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生微米級(jí)形變,拓展了聲鑷技術(shù)的應(yīng)用。該方法可提高細(xì)胞膜的流動(dòng)性,在細(xì)胞膜表面產(chǎn)生可修復(fù)微孔,從而有效提高細(xì)胞膜的通透性,實(shí)現(xiàn)了對(duì)原代免疫T細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)進(jìn)行高效轉(zhuǎn)染。而且,該方法可轉(zhuǎn)染大分子量質(zhì)粒,可對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞同時(shí)轉(zhuǎn)染CXCR4和BDNF兩種質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染效率達(dá)89%。流式細(xì)胞儀和基因測(cè)序結(jié)果表明,利用該方法轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞活性約83.9%,保證了細(xì)胞轉(zhuǎn)染的安全性。

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聲鑷轉(zhuǎn)染技術(shù)原理及超聲對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染多質(zhì)粒結(jié)果

對(duì)于轉(zhuǎn)染技術(shù)而言,不僅要保證細(xì)胞的活性,轉(zhuǎn)染細(xì)胞表達(dá)目的基因的功能更為重要。該研究建立了缺血性腦卒中模型小鼠,利用聲鑷轉(zhuǎn)染技術(shù)使間充質(zhì)干細(xì)胞成功地表達(dá)了趨化因子受體CXCR4,并發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染后間充質(zhì)干細(xì)胞能夠有效富集于腦缺血引起的炎癥區(qū)域。而且,富集后的間充質(zhì)干細(xì)胞能夠釋放腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,顯著減小腦梗死體積。在體實(shí)驗(yàn)證實(shí)了聲鑷轉(zhuǎn)染技術(shù)不僅可表達(dá)目的基因的功能,而且不會(huì)影響細(xì)胞原有的生物功能,這將為CAR-T細(xì)胞治療提供全新轉(zhuǎn)染工具,對(duì)于優(yōu)化CAR的設(shè)計(jì)和提高CAR-T的療效具有重要意義。

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超聲轉(zhuǎn)染MSC后可有效富集腦缺血位置,縮小缺血性腦卒中模型小鼠腦梗死體積

中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院的鄭海榮院士、孟龍研究員、杜克大學(xué)的Tony Jun Huang教授為本文的通訊作者,劉秀芳博士、榮寧博士為文章的第一作者,中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院為論文第一單位。該研究獲得了國(guó)家自然科學(xué)基金、廣東省自然科學(xué)基金等項(xiàng)目的支持。

論文鏈接: https://doi.org/10.1126/sciadv.adk1855


審核編輯:劉清

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